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了解酵母杂交那些事,这篇文章就够了
在所有的生命活动中,蛋白质是最终的执行者和体现者,并且随着大量生物基因组测序的完成,越来越多研究人员将重点转移到蛋白组的研究上。
Y2H玩转抗体筛选
抗体在细胞内的表达已成功用于消除蛋白质功能。这一发现表明,该技术应对疾病治疗和功能基因组学有影响,其中预测功能未知的蛋白质基因组序列。一个主要的障碍是一些抗体在真核细胞中不起作用,大概是因为抗体在细胞质中不正确地折叠。为了克服这个问题,我们已经开发了一种使用酵母双杂交体系用于筛选细胞内功能抗体的方法。我们发现几种特征抗体在真核细胞中以双杂交形式结合它们的靶抗原,我们已经能够从在体外结合抗原的scF
造血生长因子-----M-CSF
细胞因子是小分子,低分子量的非结构蛋白,对炎症和免疫力具有复杂的调节作用。包括干扰素,白介素,趋化因子家族,生长因子,肿瘤坏死因子家族和脂肪因子。细胞因子具有多效性并在许多不同功能中也起着重要作用,包括免疫细胞分化,炎症,血管生成,肿瘤发生,神经生物学,病毒发病机制等。除了炎症,免疫和感染外,细胞因子现在已经将其领域扩展到动脉粥样硬化和癌症。因此,细胞因子对于健康和疾病可能是有用的生物标志物,并充
重组抗体在哺乳动物细胞中的表达
抗体可以通过哺乳动物细胞产生,也可以通过刺激动物免疫系统产生。
酵母蛋白表达系统
酵母表达系统是蛋白质真核表达的常用系统之一,具有真核表达系统的许多优点,如蛋白质加工和折叠、翻译后修饰等。酵母蛋白表达的操作与哺乳动物相比相对简单。 巴斯德毕赤酵母的表达水平高于酿酒酵母,细胞可以高密度培养。巴斯德是近年来发展起来的一种较为完善的表达体系,通常用来表达外源蛋白的甲醇营养型酵母表达系统。
抗体分子基本结构
抗体是一种由B淋巴细胞产生的免疫球蛋白。所有的抗体分子都具有相似的结构,由四个对称的肽链结构组成,由两个相同的重链(重链、H链)和两个相同的轻链(轻链、L链)组成。轻链和重链的内部和链之间分别由二硫键连接。
蛋白表达系统之毕赤酵母表达系统介绍
蛋白质表达是指利用细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞或植物细胞表达外源基因蛋白质的一种分子生物学技术,是基因工程技术的重要组成部分之一。毕赤酵母表达系统因其低成本、高产量和一定的翻译后修饰而被越来越多的使用。
核定位组学助力核蛋白作用机制的研究—一种新的核蛋白筛选系统iNTT的构建
核蛋白在调控mRNA转录和加工、DNA复制和表观遗传基因组修饰中发挥着关键作用。因此,监测核蛋白变化的能力不仅有助于识别重要的调控蛋白,而且有助于研究核蛋白的作用机制。然而,目前还没有开发出有效的方法。黑麦对各种生物和非生物胁迫具有很强的抗性;然而,由于其基因组的复杂性和基因组序列信息的缺乏,迄今为止很少有基因功能特征。
瑞源生物|组学+酵母双杂交联合实验策略 ——interactome(互作组学)
蛋白质作为生命活动实际执行的分子,在生物机理研究中处于非常重要的地位。随着蛋白与表型的相关关系、因果关系被逐渐阐明,生物机理的研究往往需要深入到蛋白相互作用层面。如何选择合适的蛋白分子,研究与之相互作用的蛋白网络,从而阐释生理过程也是科研实践中的经典问题。另一方面,天然情况下的蛋白互作,可以采用Co-IP等技术进行检测,然而对于植物、微生物、非模式动物等研究,往往缺乏合适的抗体,定制抗体周期长造价
工程菌构建:关于PCR,你知道多少?酵母也可以菌落PCR了
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成: