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    植物色素(Phytochromes)包括脂溶性叶绿体色素水溶性细胞液色素,前者存在于叶绿体,与光合作用有关主要为叶绿素、叶黄素与胡萝卜素,三者常共存;后者存在于液泡中,特别与花朵的颜色有关,如花青素黄酮类物质。此外尚有藏红花素、辣椒红素、番茄红素、玉米黄素等。脂溶性色素不溶于水。难溶于甲醇,易溶于高浓度乙醇、乙醚、氯仿、苯等有机溶剂,胡萝卜素在乙醇中也不溶。水溶性色素主要为花色甙类,又称花青素,普遍存在于花中,溶于水及乙醇,不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂,遇醋酸铅试剂会沉淀,并能被活性炭吸附,其颜色随pH的不同而会改变。


天然植物色素的特点

 (1) 天然植物色素大多为花青素类、黄酮类、类胡萝卜类化合物,因此,食用天然色素不但无毒无害,而且很多食用天然色素含有人体必须的营养物质或本身就是维生素或具有维生素性质的物质。如核黄素、番茄红素、玉米黄色素、β- 胡萝卜素等,尤其是β- 胡萝卜素,国家已归类为营养强化剂,用于食品强化可防止人体维生素A 的缺乏症和干眼病等。还有一些天然色素具有一定的药理功能,对某些疾病有预防和治疗作用。

(2) 天然植物色素不但具有着色作用而且具有增强人体功能、保健防病等功效。如芸香苷天然食用黄色素具有使人维持毛细管正常抵抗能力和防止动脉硬化等功能,在医学上一直作为治疗心血管系统疾病的辅助药物和营养增补剂。

 (3) 大部分天然色素对光、热、氧、金属离子等很敏感,稳定性较差。

 (4) 天然色素对pH 值变化十分敏感,色调会随之发生很大变化。如花青素在酸性时呈红色,中性时呈紫色,碱性时呈蓝色。

(5) 天然色素种类繁多、性质复杂,就一种天然色素而言,应用时专用性较强,运用范围狭窄。


   

 

植物色素检测-叶绿素,花青素,类胡萝卜素,类黄酮

检测范围、检测方法、样品要求如下表:

类别

检测指标

检测方法

最少样品量

样品类型

 

叶绿素类

 

叶绿素总量

乙醇提取-比色法测定

1.5g

鲜样

叶绿素a

叶绿素b

 

胡萝卜素类

类胡萝卜素总量

乙醇提取-比色法测定

1.5g

鲜样

β胡萝卜素

苏丹红比色法测定

3g

鲜样

番茄红素

苏丹红比色法测定

3g

鲜样

 

类黄酮类

黄酮

硝酸铝盐比色法测定

3g/6g

干样/鲜样

异黄酮

紫外分光光度法测定

3g/6g

干样/鲜样

花青素

比色法测定

1.5g

鲜样

花色苷

比色法测定

4g

鲜样

 

 

花青素类

矢车菊素

以乙醇/盐酸提取、浓盐酸水解方法提取样品中花青素,并以安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB公司Qtrap6500质谱仪检测

2g

新鲜样品

飞燕草素

新鲜样品

天竺葵素

新鲜样品

芍药素

新鲜样品

 

 

类胡萝卜素

α类胡萝卜素

 

高效液相色谱法

1g

新鲜样品

β类胡萝卜素

新鲜样品

番茄红素

新鲜样品

叶黄素

新鲜样品

 

 

 

 

 

植物色素检测-叶绿素,花青素,类胡萝卜素,类黄酮

检测范围、检测方法、样品要求如下表:

类别

检测指标

检测方法

最少样品量

样品类型

 

叶绿素类

 

叶绿素总量

 

 

乙醇提取-比色法测定

 

 

1.5g

鲜样

叶绿素a

叶绿素b

 

胡萝卜素类

类胡萝卜素总量

 

乙醇提取-比色法测定

 

1.5g

鲜样

β胡萝卜素

苏丹红比色法测定

3g

鲜样

番茄红素

苏丹红比色法测定

3g

鲜样

 

类黄酮类

黄酮

硝酸铝盐比色法测定

3g/6g

干样/鲜样

异黄酮

紫外分光光度法测定

3g/6g

干样/鲜样

花青素

比色法测定

1.5g

鲜样

花色苷

比色法测定

4g

鲜样

 

 

花青素类

矢车菊素

以乙醇/盐酸提取、浓盐酸水解方法提取样品中花青素,并以安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB公司Qtrap6500质谱仪检测

 

 

 

2g

新鲜样品

飞燕草素

新鲜样品

天竺葵素

新鲜样品

芍药素

新鲜样品

 

 

类胡萝卜素

α类胡萝卜素

 

 

 

高效液相色谱法

 

 

 

1g

新鲜样品

β类胡萝卜素

新鲜样品

番茄红素

新鲜样品

叶黄素

新鲜样品

 

 

 

 

    花青素(Anthocyanins)又称花色素,是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,属于黄铜类化合物,自然条件下游离状态的花青素极少见,主要以糖苷形式存在,花青素常与一个或多个葡糖糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等通过糖苷键形成花色苷。

    花青素作为一种天然食用色素,安全、无毒,能缓解眼部疲劳,加速维生素A在视网膜上合成视紫质的速度,并且是迄今为止发现的强效的自由基清除剂,具有一定营养和药理作用,在食品、化妆品、医药等方面有着巨大的应用潜力。

自然界有超过300种不同的花青素,他们来源于不同种水果和蔬菜,如紫甘薯、越橘、酸果蔓、黑枸杞、蓝莓、葡萄、接骨木红、黑加仑、紫胡萝卜、红甘蓝。


测范围:飞燕草素(Delchindin)、矢车菊素(Cyanidin)、芍药花色素(Peoidin、天竺葵素(Pelargonidin)花青素检测指标

    检测方法:以乙醇/盐酸提取、浓盐酸水解方法提取样品中花青素,并以安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB公司Qtrap6500质谱仪检测

    最低样品量:植物新鲜样品2g

    存储与运输:干冰运输

 

    花青素(Anthocyanins)又称花色素,是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,属于黄铜类化合物,自然条件下游离状态的花青素极少见,主要以糖苷形式存在,花青素常与一个或多个葡糖糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等通过糖苷键形成花色苷。

    花青素作为一种天然食用色素,安全、无毒,能缓解眼部疲劳,加速维生素A在视网膜上合成视紫质的速度,并且是迄今为止发现的强效的自由基清除剂,具有一定营养和药理作用,在食品、化妆品、医药等方面有着巨大的应用潜力。

自然界有超过300种不同的花青素,他们来源于不同种水果和蔬菜,如紫甘薯、越橘、酸果蔓、黑枸杞、蓝莓、葡萄、接骨木红、黑加仑、紫胡萝卜、红甘蓝。


测范围:飞燕草素(Delchindin)、矢车菊素(Cyanidin)、芍药花色素(Peoidin、天竺葵素(Pelargonidin)花青素检测指标

   

 

检测方法:以乙醇/盐酸提取、浓盐酸水解方法提取样品中花青素,并以安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB公司Qtrap6500质谱仪检测

最低样品量:植物新鲜样品2g

存储与运输:干冰运输

 

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实验

服务简介
一、酵母单杂交

酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。

 

 二、酵母双杂交

酵母双杂交及系统是一种鉴定和检测活细胞内蛋白质相互作用的研究方法,是在真核模式生物酵母中进行的,因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点,现已被应用于多个研究领域。分为膜蛋白和核蛋白双杂交。


应用领域
植物:自交不亲和机理研究

病毒:朊蛋白、病毒蛋白相互作用蛋白筛选

信号通路:转录因子、雌激素α受体相互作用蛋白筛选

癌症医学:癌症相关蛋白、凋亡相关蛋白相互作用蛋白筛选

寄生虫医学:毒力因子致病机制研究、半乳糖凝集素互作蛋白筛选

基础原理研究:肌球蛋白、蛋白酶体调节因子相互作用蛋白筛选、受精卵发育

   

项目名称

内容

交付标准

服务周期

酵母双杂文库构建

RNA提取、反转录、 cDNA处理、基因与载体的连接、文库质粒提取、文库产品指标

酵母双杂交文库甘油菌、酵母双杂交文库质粒、文库构建报告、文库构建图片

25个工作日,如需转化酵母延长15个工作日

酵母双杂文库筛选

诱饵质粒构建与活测、与双杂库共转感受态酵母、文库筛选、阳性克隆鉴定、回转验证

完整的筛库流程实验报告、鉴定出的阳性克隆测序

2个月左右

 

订购信息

 

文库构建流程

总RNA提取——mRNA分离——cDNA合成——基因与载体的连接——文库质粒提取——文库产品指标

单/双杂筛选流程

诱饵质粒构建与活测——与单/双杂库共转感受态酵母——文库筛选——阳性克隆鉴定——回转验证——报告整理

 

样品要求
细胞样本:细胞数量大于1×10^7;动物样本:大于1 g;植物样本:大于2 g;总RNA:大于200 µg
筛选服务:客户提供诱饵基因或构建好的诱饵质粒

 案例分析

1载体构建
根据客户提供序列构建 BD 重组载体,进行引物设计和测序验证。
2自激活检测结果

  

                                     pGADT7-LargeT/pGBKT7-p53 为阳性对照

                               pGADT7-LargeT/pGBKT7-LaminC 为阴性对照

实验现象结论

对照菌株在 SD-TL 缺陷平板上都能正常生长,而仅有阳性对照可在 SD-TLHA缺陷平板生长。pGADT7+pGBKT7-ABC 转化子中随机挑选的 6 个菌落在 SD-TLHA 缺陷平板上不能生长,生长状态同阴性对照,因此不存在自激活。

结果:ABC 诱饵克隆没有自激活作用。

3文库筛选

4阳性克隆鉴定

 

      筛库阳性克隆 ADE2 和 HIS3 报告基因检测

编号 1-34 分别是筛到的 34 个初始阳性克隆,编号“+”为阳性对照,编号“-”为阴性对照。

 

在 ADE2 和 HIS3 报告基因的检测结果中,可以看到,阳性对照在SD-TL和SD-TLHA 都能正常生长,而阴性对照由于不会激活 ADE2 和 HIS3 报告基因,在 SD-TL 可以正常生长,但在缺少 Histidine 和 Adenine 这两种成分的 SD-TLHA 平板上不能生长。因此,在34个初始阳性克隆中,除 4、8、26、28、30、32、33、34 号之外均能在SD-TLHA 生长,表明激活了HIS3和ADE2 报告基因。

 

5)回转验证

 

阳性克隆回转验证 His Ade 报告基因检测

 

15 种阳性克隆在SD-TLSD-TLHA 缺陷平板的生长情况。标注“+”为阳性对照,标注“-”为阴性对照。

 

结果显示,15 个阳性克隆中 22 号不能激活 HIS3 ADE2 报告基因;其余均能激活 HIS3 ADE2 报告基因。

 

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