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产品简介
    亚细胞定位是指某种蛋白或某个基因表达产物在细胞内的具体存在部位,如在胞核,胞浆内,细胞膜或某一特定细胞器上存在。蛋白分布在不同细胞的不同部位,对蛋白的亚细胞定位分析有助于蛋白功能研究的初步判断。


项目特色
    利用生物信息学软件进行亚细胞定位预测分析辅助于实验操作,更加精准的定位蛋白质的位置。从载体构建到亚细胞定位,南京瑞源生物提供一站式服务。

    科研思路:其一为软件预测,我们推荐使用戈登生命科学研究所(Gordon Life Science Institute)的创始人周国华教授在Nature Science上发表的预测软件Cell PLoc2.0(http://www.csbio.sjtu.edu.cn/bioinf/Cell-PLoc-2/)其二通过实验验证,通过对目的蛋白的标记,例如融合绿色荧光蛋白GFP,使用扫描共聚焦显微镜激发荧光,从而对蛋白的表达分布予以确认。依据对亚细胞分布的精确度不同,亚细胞定位的实验设计也分成简化型亚细胞定位分析和內参型共定位分析。对于亚细胞定位分析,主要通过构建融合荧光蛋白的过表达质粒,转化烟草和原生质体瞬时表达体系确定其定位及共定位情况。让科研更轻松!

可供选择的多种遗传转化体系(瞬时转化)

1:单子叶水稻原生质体转化系统

2:双子叶拟南芥原生质体转化系统

3:烟草转化系统

   

 

   

项目名称

内容

交付标准

服务周期

酵母双杂文库构建

RNA提取、反转录、 cDNA处理、基因与载体的连接、文库质粒提取、文库产品指标

酵母双杂交文库甘油菌、酵母双杂交文库质粒、文库构建报告、文库构建图片

25个工作日,如需转化酵母延长15个工作日

酵母双杂文库筛选

诱饵质粒构建与活测、与双杂库共转感受态酵母、文库筛选、阳性克隆鉴定、回转验证

完整的筛库流程实验报告、鉴定出的阳性克隆测序

2个月左右

 

技术路线:

    客户提供序列信息或质粒或菌株等实验材料——亚细胞定位预测软件分析——植物过表达载体构建——转化农杆菌——农杆菌介导法浸染烟草或者水稻——亚细胞定位——激光共聚焦扫描 

交付标准:

1. 构建好的载体的图谱、全序列和注释信息;

2. 构建部位的测序结果;

3. 构建好的载体及其保存菌株通过快递直达申请人手中;

4. 完整的实验报告(包括详细实验步骤及实验结果),符合SCI发表要求的亚细胞定位激光共聚焦整理图片和原始图片。

                                                水稻原生质体亚细胞定位示例图                       

                                               

                                                               烟草亚细胞定位示例图

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