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服务简介

 

凝胶阻滞或电泳迁移率实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA结合蛋白质和相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理,当转录因子与特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。

这一技术最初用于研究DNA结合蛋白质,目前已用于研究RNA结合蛋白质和特定的RNA序列的相互作用。竞争实验中采用含蛋白质结合序列的DNA或RNA探针,和其它相关的探针,来确定它们相互作用的特异性及强度。

 

如图所示, DNA-复合物比非结合的探针移动得慢;当检测DNA结合蛋白,可用纯化蛋白、部分纯化蛋白或核细胞抽提液;竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA片段和寡核苷酸片段(特异)和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA结合蛋白的特异性;在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

服务流程

 标准蛋白样品制备与定量 探针设计合成 蛋白与探针等进行反应 SDS-PAGE电泳 紫外胶联 杂交孵育 图片扫描

EMSA服务流程

订购信息

 

   

样品要求

提供样品

1) 活细胞(>2×10^7)、纯化的蛋白、DNA样品及序列;

2) 目的蛋白一抗及其说明书;

3) 基因信息、蛋白信息、物种信息;

4) 阳性对照样品(尽量提供);

交付标准

  1. 原始数据、结果图片

 2. 标准实验报告

 3. SCI标准Result Figure

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电话:400-863-8520;025-5767-5161

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