EMSA
▼服务简介
凝胶阻滞或电泳迁移率实验（Electrophoretic mobility shift assay，EMSA）是一种研究DNA结合蛋白质和相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理，当转录因子与特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。
这一技术最初用于研究DNA结合蛋白质，目前已用于研究RNA结合蛋白质和特定的RNA序列的相互作用。竞争实验中采用含蛋白质结合序列的DNA或RNA探针，和其它相关的探针，来确定它们相互作用的特异性及强度。
如图所示， DNA-复合物比非结合的探针移动得慢；当检测DNA结合蛋白，可用纯化蛋白、部分纯化蛋白或核细胞抽提液；竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA片段和寡核苷酸片段（特异）和其它非相关的片段（非特异），来确定DNA结合蛋白的特异性；在竞争的特异和非特异片段的存在下，依据复合物的特点和强度来确定特异结合。
▼服务流程
标准蛋白样品制备与定量 > 探针设计合成 > 蛋白与探针等进行反应 > SDS-PAGE电泳 > 紫外胶联 > 杂交孵育 > 图片扫描
▼样品要求
提供样品
1) 活细胞（>2×10^7）、纯化的蛋白、DNA样品及序列;
2) 目的蛋白一抗及其说明书；
3) 基因信息、蛋白信息、物种信息；
4) 阳性对照样品（尽量提供）。
▼交付标准
1、原始数据、结果图片
2、标准实验报告
3、SCI标准Result Figure
▼服务内容
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服务项目 |
说明 |
报价 |
周期 |
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荧光标记探针 |
利用近红外荧光标记探与蛋白结合在疑胶板上通过 近红外扫描仪直接测定电泳位置
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询价 |
3~5个工作日 |
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蛋白标准样品的制备 与浓度精确测定
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蛋白样品制备要现配现用 |
1~2周 |
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EMSA凝胶电泳迁移检测 |
1个探针和1个蛋白做一个EMSA反应 (4条泳道,包括1条free probe泳道,3条蛋白梯度泳道)
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3~5个工作日 |
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结合蛋白的纯化与质谱检测 (未知蛋白需要检测)
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条带切胶蛋白纯化,质谱检辺进行肽段检索与聚类分析 |
1周 |
▼案例展示
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