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核系统酵母文库

▼服务简介

酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。

 

▼服务简介

酵母双杂交及系统是一种鉴定和检测活细胞内蛋白质相互作用的研究方法,是在真核模式生物酵母中进行的,因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点,现已被应用于多个研究领域。

▼应用领域

植物
自交不亲和机理研究
病毒

朊蛋白、病毒蛋白相互作用蛋白筛选

信号通路

转录因子、雌激素α受体相互作用蛋白筛选

癌症医学

癌症相关蛋白、凋亡相关蛋白相互作用蛋白筛选

寄生虫医学

毒力因子致病机制研究、半乳糖凝集素互作蛋白筛选

基础原理研究
肌球蛋白、蛋白酶体调节因子相互作用蛋白筛选、受精卵发育

▼服务流程

▼样本要求

    细胞样本:细胞数量大于1×10^7

    动物样本:大于1 g

    植物样本:大于2 g

    总RNA:大于200 µg

▼服务内容

酵母文库构建

基本实验步骤

详细实验步骤

   周期   

交付材料

RNA提取

RNA提取     mRNA分离

5

酵母双杂文库甘油菌1.5ml EP管(1管)

酵母双杂文库质粒1.5ml EP1管)

Word文档电子版项目报告

cDNA文库构建

 

cDNA合成与接头连接

cDNA按长度分离

均一化处理(可选)

重组到酵母双杂交载体pGADT7上和电转化

文库检测和质粒提取

数据整理和分析

 

25

 

酵母双杂交文库筛选

 基本实验步骤 

详细实验步骤

   周期   

交付材料

自激活检测

          诱饵质粒的自激活检测          

10

阳性克隆程序结果(根据测序结果而定)

Word文档电子版项目报告(含实验数据)

文库筛选

 

诱饵质粒与文库质粒共转

酵母筛选的条件优化

筛选结果测序

 

30

回转验证

 

筛选结果回转验证

数据整理和分析

 

10

阳性克隆酵母质粒

Word文档电子版项目报告(含实验数据)

 

酵母双杂交一对一验证

基本实验步骤

详细实验步骤

   周期   

交付材料

自激活检测

诱饵质粒的自激活检测

10

阳性克隆酵母菌株

Word文档电子版项目报告

一对一验证

实验组:pGBKT7-A+pGADT7-B

阳性对照      阴性对照

10

▼案例展示

 

文献案例

TaTLP1 interacts with TaPR1 to contribute to wheat defense responses to leaf rust fungus

期刊:Plos Genetics(IF:5.174)   DOI:10.1371/journal.pgen.1008713

 

 

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电话:400-863-8520;025-5767-1761

邮箱:order@bestofbest.top

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