图片展示

核系统酵母文库

▼技术原理

酵母双杂交系统是一种鉴定活细胞内蛋白质相互作用的研究方法,其原理是:Gal4转录因子由DNA结合域(binding domain,BD)和转录激活域(active domain,AD)组成,二者可以分开独立表达为有功能的蛋白。当二者在物理空间上靠近时可以表现出完整的转录因子活性,基于此,把目的蛋白分别与BD、AD融合表达,当目的蛋白发生互作时,使得BD、AD在物理空间可以靠近,这时就能够表现出完整的转录因子功能,从而激活下游基因的表达。

▼服务简介

酵母双杂是一种利用酵母表达系统分析蛋白质相互作用的技术,它具有高度敏感性和广泛应用性。南京瑞源生物是一家专业从事酵母双杂服务的公司,自成立以来,我们始终致力于提升酵母双杂技术的水平和质量。我们的团队拥有多年的酵母双杂筛选经验,能够根据客户的需求。我们以诚信和专业为原则,对待每一位客户和每一个项目,保证反馈真实可靠的结果和数据。


▼服务优势

质量保证:进行2次筛选(三缺→四缺),保证筛选结果;
交付标注:实验报告、结果图片、高通量测序+GO、KEGG分析、报告解读文档;
测序方式:除一代测序,提供NGS测序与分析,确保全部克隆被鉴定;
生信分析:专业的生信团队进行移码分析(不移码数量≥8),功能注释,GO和KEGG分析;
售后服务:耐心与客户沟通交流,保证交付满意度


▼应用领域

植物
自交不亲和机理研究
病毒

朊蛋白、病毒蛋白相互作用蛋白筛选

信号通路

转录因子、雌激素α受体相互作用蛋白筛选

癌症医学

癌症相关蛋白、凋亡相关蛋白相互作用蛋白筛选

寄生虫医学

毒力因子致病机制研究、半乳糖凝集素互作蛋白筛选

基础原理研究
肌球蛋白、蛋白酶体调节因子相互作用蛋白筛选、受精卵发育

▼服务流程

▼交付展示

▼服务内容

酵母文库构建

基本实验步骤

详细实验步骤

   周期   

交付材料

RNA提取

RNA提取     mRNA分离

5

酵母双杂文库甘油菌1.5ml EP管(4管)

酵母双杂文库质粒1.5ml EP(4管>400ug)

文库库容量>1*107CFU

平均插入片段0.8 - 1.5 kb (因物种而异)

空载率<5%

Word文档电子版项目报告

cDNA文库构建

 

cDNA合成与接头连接

cDNA按长度分离

均一化处理(可选)

重组到酵母双杂交载体pGADT7上和电转化

文库检测和质粒提取

数据整理和分析

 

21

 

酵母双杂交文库筛选

 基本实验步骤 

详细实验步骤

   周期   

交付材料

自激活检测

          诱饵质粒的自激活检测          

10

阳性克隆测序结果(根据测序结果而定)

Word文档电子版项目报告(含实验数据)

文库筛选

 

诱饵质粒与文库质粒共转

酵母筛选的条件优化

筛选结果测序

 

30

回转验证

 

筛选结果回转验证

数据整理和分析

 

10

阳性克隆酵母质粒

Word文档电子版项目报告(含实验数据)

 

酵母双杂交一对一验证

基本实验步骤

详细实验步骤

   周期   

交付材料

自激活检测

诱饵质粒的自激活检测

10

阳性克隆酵母菌株

Word文档电子版项目报告

一对一验证

实验组:pGBKT7-A+pGADT7-B

阳性对照      阴性对照

10

▼案例展示

1. 严格的自激活检测与3AT浓度 

 

2. 高标准的回转验证

 

3. 克隆比对及移码分析

 

4. 全克隆NGS测序,简单易懂的结果呈现

 

 

 


瑞源生物服务流程

案例报告

图片展示

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