木薯MinE2基因的亚细胞定位和表达分析

中文标题:木薯MinE2基因的亚细胞定位和表达分析

文章作者:刘肖寒,曹鹏,王聪聪,黄武,李双宝,闵义

发表单位:海南大学热带作物学院

发表期刊: 分子植物育种


文献点击下载


研究背景:

试验田生长的木薯,其叶片有顽固的细胞壁和后角质层会导致酶水解不完全,从而影响原生质体的分离。因此我们用木薯组培苗分离提取高质量的原生质体,用于质粒转染实验。在亚细胞定位结果中,瞬时表达虽然不是研究亚细胞定位的唯一方法,但是在 Kim 等(2009)的研究结果中,瞬时表达相对于稳定遗传转化能够高效得出实验结果。因此构建 1300-GFP-MinE2 瞬时表达载体,在原生质体中瞬时表达 MinE2-GFP 融合蛋白,可快速定位木薯 MinE2 蛋白。

主要研究结果:

亚细胞定位

研究结论:

亚细胞定位实验结果中我们发现, MinE2 蛋白定位于叶绿体上,过表达 MinE2 蛋白,使得质体分裂出现异常,出现一些小的叶绿体;根据质体分裂过程,这些小的叶绿体可能是质体分裂前期一些未分化的原质体。在正常细胞的生命活动中,叶绿体的数量和大小是相对稳定的,植物叶片的光合作用与叶绿体数量和大小相关。因此,通过 MinE2 基因对质体分裂的影响调控叶绿体的数量和大小,对于植物光合作用具有重要意义。

在大肠杆菌过表达 MinE2 蛋白的实验中, MinE2 蛋白对大肠杆菌的分裂有一定的影响,使得大肠杆菌异常分裂产生一些小的细胞类似于前面转 MinE2-GFP 过表达的原生质体中产生小质体的现象。 MinE2 蛋白在拟南中过表达导致拟南非正常分裂所呈现出来的结果是一致的。所以在大肠杆菌中过表达 MinE2 基因,异常分裂产生小细胞的现象,说明 MinE2 基因在质体分裂中起着重要的作用。质体异常分裂产生的小质体被快速降解掉不能长时间存在,解释了原生质体中的小叶绿体不易被发现的原因。同时这些小细胞的产生与降解过程不明确为后续研究提供了一条新的思路。

 

小编有话说:

综上,在本研究中,分离鉴定了木薯 MinE2 基因,木薯 MinE2基因编码的蛋白是亲水性蛋白,其功能具有一定的高度保守性,在木薯进化过程中,其功能仍保持不变。过表达 MinE2 基因会影响质体分裂,由于植物叶片光合作用与叶绿体的数量和大小相关,因此 MinE2 基因的表达是否会进一步影响光合作用需要我们不断探索和研究,为木薯光合作用研究提供一条新的思路。

感兴趣的读者可以主动下载阅读。

 

木薯MinE2基因的亚细胞定位和表达分析
试验田生长的木薯,其叶片有顽固的细胞壁和后角质层会导致酶水解不完全,从而影响原生质体的分离。因此我们用木薯组培苗分离提取高质量的原生质体,用于质粒转染实验。在亚细胞定位结果中,瞬时表达虽然不是研究亚细胞定位的唯一方法,但是在 Kim 等(2009)的研究结果中,瞬时表达相对于稳定遗传转化能够高效得出实验结果。因此构建 1300-GFP-MinE2 瞬时表达载体,在原生质体中瞬时表达 MinE2-G
长按图片保存/分享

友情推荐:南京维百瑞理化激素检测服务公司

图片展示

电话:400-863-8520;025-5767-5161

邮箱:order@bestofbest.top

地址:南京市栖霞区江苏生命科技园F7栋

科研快递订阅

  • 名字 *

  • 邮箱 *

  • 电话

  • 机构 *

  • 提交

  • 验证码
    看不清?换一张
    取消
    确定

咨询留言

  • 姓名 *

  • 电话 *

  • 留言 *

  • 提交

  • 验证码
    看不清?换一张
    取消
    确定

Copyright © 南京瑞源生物技术有限公司 版权所有      苏ICP备20003978号

Copyright © 瑞源生物

苏ICP备20003978号

联系电话
400-8638520
联系电话
025-57671761
二维码