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采用酵母双杂交系统筛选梨 PbTMT4 互作因子

中文标题:采用酵母双杂交系统筛选梨 PbTMT4 互作因子

文章作者:程寅胜,杨 立,陈健秋

发表单位:湖北省农业科学院果树茶叶研究所

发表期刊: 湖 北 农 业 科 学

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文章摘要:

酵母双杂交技术系统(Yeast two-hybrid system)是一种建立于酵母体内的用于分析研究蛋白质结构之间可以相互促进作用的基因信息系统。研究蛋白质之间的相互作用,蛋白质功能可以揭示分子水平上,而另一方面,植物生长,必不可少的生活发展,分化和凋亡规律,植物的调节机制,新的蛋白质功能的发现和建立蛋白质-蛋白质相互作用网络提供了重要的理论依据。它具有灵敏度高的优点,可以描述蛋白质之间的微弱、瞬时作用。初步研究筛选出的PbTMT4基因相互作用的因素,包括参与植物生长和发育,调整可逆富含半胱氨酸蛋白的植物根系生长和根毛形成三足鼎立,5个蛋白具有生物防御或非生物胁迫,包括具有重金属解毒功能富含半胱氨酸的蛋白质可以改善转基因植物反向转运蛋白,除去过量的自由基在植物过氧化物酶的Na盐,碱性亮氨酸拉链转录因子及效果具有组蛋白修饰;与参与生殖生长3个植株,抑制花粉管伸长的CRP超家族因素和诱导快速碱化柱头花粉管生长取向/粘附风格富含半胱氨酸,开花控制组蛋白,靶向的于雄配子体开花的Rossmann折叠超家族蛋白的表达; 还有一些影响进行细胞间信号传导的磷脂酶。这些初步结果表明,在PbTMT4参与生活的复杂的代谢过程,包括营养生长,生殖生长,环境压力和信号转导等生命过程的植物。液泡膜单糖转运蛋白(Tonoplast monosaccharide transporter,TMT)是定位于液泡膜的单糖转运蛋白,负责糖在胞质和液泡之间的转运,属于协助扩散超家族(Major facilitator superfamily,MFS),也称为共转运蛋白家族,在所有的生物中都有发现。

研究结果:

酵母双杂

结论:

确定了梨中六个TMT家庭成员(PbTMT1-PbTMT6),以及PbTMT4基因密切相关的糖在果实发育和成熟过程中的积累,是一个重要的候选基因,影响果实品质。 随后进行研究结果表明,PbTMT4 定位于液泡膜上,能够得到显著水平提高转基因植物糖含量, 同时对植株的生长发育发展具有重要促进社会作用。 逆境处理发现PbTMT4转基因株系受到的损伤小于野生型植物,表明该基因可能在抗NEA胁迫中发挥重要的调控作用。本研究中所希望的酵母双杂交技术,采用梨果cDNA文库,筛选初始交互因子PbTMT4提供基本糖传输机制,并且在该基因供进一步研究植物生长和发育的分子调控的。

采用酵母双杂交系统筛选梨 PbTMT4 互作因子
酵母双杂交技术系统(Yeast two-hybrid system)是一种建立于酵母体内的用于分析研究蛋白质结构之间可以相互促进作用的基因信息系统。研究蛋白质之间的相互作用,蛋白质功能可以揭示分子水平上,而另一方面,植物生长,必不可少的生活发展,分化和凋亡规律,植物的调节机制,新的蛋白质功能的发现和建立蛋白质-蛋白质相互作用网络提供了重要的理论依据。
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