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为了阐明蓝光稳定COR27和COR28蛋白的机制,我们在拟南芥cDNA文库上进行了酵母双杂交筛选,以鉴定COR27和COR28相互作用蛋白,结果显示COR27和COR28与COP1相互作用,双分子荧光实验也表明COP1与植物细胞中的COR27和COR28相互作用。COP1是光信号转导中的核心抑制因子,通过调控bZIP类转录因子HY5的蛋白稳定性而负调控光形态建成。
图1. COR27和COR28与COP1交互
为了研究COR27和COR28是否可能在调节光形态发生中起作用,我们在恒定的白光,长日条件,短日条件或黑暗中生长了Col-0,COR27,COR28,COR27,COR28和过表达COR27或COR28的转基因幼苗。结果表明,COR27和COR28促进下胚轴伸长,并充当蓝光,红光和远红光介导的下胚轴伸长抑制的负调节剂。
图2:COR27和COR28促进下胚轴伸长
COR27和COR28调节光形态发生和下游延伸相关基因的表达,我们使用酵母双杂交试验测试COR27,COR28和已知参与调节下胚轴伸长的各种蛋白质之间的相互作用,在测试的32种蛋白中,HY5与COR27和COR28相互作用,表明它们可能共同起作用以调节转录和光形态发生。COR27和COR28和HY5共同调控了235个基因,对于这些基因中的53.2%,cor27 cor28双重突变体与hy5具有相反的作用,其中17.9%被HY5促进,但被COR27和COR28抑制,其余35.3%被HY5抑制,但被COR27和COR28促进,这些结果表明,COR27,COR28和HY5以相反的方式作用于大量共同基因的调控。
图3:COR27和COR28与HY5相互作用以调节各种基因的表达
参考文献:
【1】Arabidopsis CAM7 and HY5 physically interact and directly bind to the HY5 promoter to regulate its expression and thereby promote photomorphogenesis. The Plant cell 26, 1036-1052(2014)
【2】Differential expression of RNA-Seq data at the gene level-the DESeq package. European Molecular Biology Laboratory (EMBL)(2013)
【3】Regulatory hierarchy of photomorphogenic loci: allele-specific and light-dependent interaction between the HY5 and COP1 loci. The Plant cell 6, 613-628.(1994)
文章链接:http://www.plantcell.org/content/early/2020/08/07/tpc.20.00195