图片展示

FIPS|山东农业大学研究团队利用Y1H技术揭示MdMYC2 和 MdERF3 积极共同调节苹果中的 α-法呢烯生物合成

作者:南京瑞源生物技术有限公司 浏览: 发表时间:2021-10-26 14:33:46

α-法呢烯是一种倍半萜烯挥发性化合物,在植物防御中起着重要作用,已知与昆虫吸引以及苹果和梨果实在冷藏期间的表面冻伤有关。但转录因子调控苹果α-法呢烯生物合成的机制尚未阐明。

山东农业大学研究团队在frontiers in plant science发表了一篇名为“MdMYC2 and MdERF3 Positively Co-Regulate α-Farnesene Biosynthesis in Apple”的文章揭示了MdMYC2 和 MdERF3 积极共同调节苹果中的 α-法呢烯生物合成。


在这里,我们报告了两种转录因子 MdMYC2 和 MdERF3 调节苹果果实中 α-法呢烯的生物合成。双荧光素酶测定和 Y1H 测定表明 MdMYC2 和 MdERF3 有效地反式激活了MdAFS启动子。EMSA 显示 MdERF3 直接结合MdAFS启动子中的 DRE 基序。随后,MdMYC2和MdERF3 的过表达在苹果愈伤组织中,显着激活了MdHMGR2和MdAFS的转录水平。此外,苹果果实中MdMYC2和MdERF3 的瞬时过表达显着增加了MdAFS表达,从而增加了α-法呢烯的产生。这些结果表明MdMYC2和MdERF3是α-法呢烯生物合成的正调节因子,在α-法呢烯生产的基因工程中具有重要价值。


我们进行了萤火虫萤光素酶(LUC)互补成像测定,以测试是否MdMYC2和MdERF3能调节MdAFS的表达。正如预测的那样,这两个转录因子对MdAFS启动子显示出反式激活效应(图 2)。研究表明,转录因子MdMYC2和MdERF3可以结合G-box和DRE元件来调节下游基因的表达。

图 2萤火虫荧光素酶 (Luc) 互补成像分析

进行 Y1H 测定以测试MdMYC2和MdERF3是否可以结合MdAFS 的启动子. 因此,G-box 和四个重复的 DRE 基序被整合到酵母细胞中。我们发现,事实上,这两种转录因子能够结合 G-box 和 DRE 基序。此外,为了符合结合结果,我们使用 MdERF3 以及包含 DRE 基序的MdAFS 的25 bp 启动子片段进行了 EMSA 。所述的基序DRE MdAFS启动子被识别MdERF3(图3)。这些结果表明 MdMYC2 和 MdERF3 有效激活了 α-法呢烯生物合成基因MdAFS,并且 MdERF3 直接结合了MdAFS启动子中的 DRE 基序。

图 3 MdMYC2 和 MdERF3 与MdAFS启动子结合

转基因苹果果实的产生和测试在技术和实验上都具有挑战性。选择该测定来验证MdMYC2和MdERF3在苹果果实中 α-法呢烯的生物合成中的作用。用MdMYC2浸润的果皮的 α-法呢烯含量分别为 8.97 μg g –1,这表示相对于用空载体浸润的果皮(7.4 μg g –1)显着增加。同时,用MdERF3渗透的苹果皮的 α-法呢烯含量水平显着增加了约 1.7 倍。


这是关于在转录水平调节α-法呢烯生物合成机制的第一份报告。我们的结果表明 MdMYC2 和 MdERF3 作为 α-法呢烯生物合成相关基因的正调节因子发挥其调节作用。此外,我们的研究确定了关键候选基因和使用代谢工程方法实现高产 α-法呢烯的新策略。


文献链接:https://doi.org/10.3389/fpls.2020.512844

FIPS|山东农业大学研究团队利用Y1H技术揭示MdMYC2 和 MdERF3 积极共同调节苹果中的 α-法呢烯生物合成
α-法呢烯是一种倍半萜烯挥发性化合物,在植物防御中起着重要作用,已知与昆虫吸引以及苹果和梨果实在冷藏期间的表面冻伤有关。但转录因子调控苹果α-法呢烯生物合成的机制尚未阐明。
长按图片保存/分享
0
图片展示

电话:400-863-8520;025-5767-1761

邮箱:order@bestofbest.top

地址:南京市栖霞区仙林街道纬地路9号江苏生命科技园F7栋

图片展示

微信公众号

全资子公司

维百瑞生物

版权所有:南京瑞源生物技术有限公司|想了解酵母文库解决方案,技术服务,靠谱方法,多少钱,哪家好请联系我们.       苏ICP备20003978号

在线咨询

您好,请点击在线客服进行在线沟通!

联系方式
联系电话
400-8638520
联系电话
025-57671761
扫一扫二维码
二维码
添加微信好友,详细了解产品
使用企业微信
“扫一扫”加入群聊
复制成功
添加微信好友,详细了解产品
我知道了