转录因子自激活验证
▼服务简介
针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子,进行生物信息学方法预测,得到可能的目标调控蛋白/转录因子,通过Smart分析,设置合理截短方案,可以方便高效地寻找转录因子核心激活区域。
▼服务内容
转录因子激活序列定位 |
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基本实验步骤 |
详细实验步骤 |
周期 |
交付材料 |
方案设计一 |
Smart数据库分析 |
1天 |
阳性克隆酵母菌株 Word文档电子版项目报告(含实验数据) |
自激活验证第一轮实验 |
N端、C端载体构建 全长、N端、C端自激活测试 |
14天 |
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方案设计二 |
根据第一轮结果,设计截短方案 |
1天 |
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自激活验证第二轮实验 |
载体构建 自激活验证测试 |
14天 |
▼案例展示
验证pGBKT7-A、pGBKT7-A-C、pGBKT7-A-N转录自激活
结果分析:对照菌株在SD-T缺陷平板上都能正常生长,而在SD-TH、SD-THA、SD-THA+x-α-gal缺陷平板不能生长。pGBKT7-A、pGBKT7-A-C、pGBKT7-A-N、pGBKT7转化子中随机挑选的菌落在SD-T缺陷平板上均能生长,而在SD-TH、SD-THA平板上,pGBKT7-A、pGBKT7-A-C均能正常生长,pGBKT7-A-N与阴性对照一致。在SD-THA+x-α-gal平板,pGBKT7-A、pGBKT7-A-C能正常生长,并能显色,而pGBKT7-A-N与阴性对照pGBKT7一致。
结论:pGBKT7-A、pGBKT7-A-C有自激活现象,pGBKT7-A-N没有自激活现象。
案例报告