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转录因子自激活验证

▼服务简介

针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子,进行生物信息学方法预测,得到可能的目标调控蛋白/转录因子,通过Smart分析,设置合理截短方案,可以方便高效地寻找转录因子核心激活区域。

▼服务内容

转录因子激活序列定位

基本实验步骤

详细实验步骤

   周期   

交付材料

方案设计一

Smart数据库分析

1

阳性克隆酵母菌株

Word文档电子版项目报告(含实验数据)

 自激活验证第一轮实验 

N端、C端载体构建

全长、N端、C端自激活测试

14

方案设计二

 根据第一轮结果,设计截短方案 

1

自激活验证第二轮实验

载体构建

 自激活验证测试

14

▼案例展示

验证pGBKT7-A、pGBKT7-A-C、pGBKT7-A-N转录自激活 

 

结果分析:对照菌株在SD-T缺陷平板上都能正常生长,而在SD-TH、SD-THA、SD-THA+x-α-gal缺陷平板不能生长。pGBKT7-A、pGBKT7-A-C、pGBKT7-A-N、pGBKT7转化子中随机挑选的菌落在SD-T缺陷平板上均能生长,而在SD-TH、SD-THA平板上,pGBKT7-A、pGBKT7-A-C均能正常生长,pGBKT7-A-N与阴性对照一致。在SD-THA+x-α-gal平板,pGBKT7-A、pGBKT7-A-C能正常生长,并能显色,而pGBKT7-A-N与阴性对照pGBKT7一致。

 

结论:pGBKT7-A、pGBKT7-A-C有自激活现象,pGBKT7-A-N没有自激活现象。

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