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Anti-GFP标签蛋白免疫沉淀试剂盒(磁珠法)

rProtein A+G免疫沉淀试剂盒(磁珠法)(anti-GFP抗体)

▼产品简介

本试剂盒包含高质量的Protein A+G磁珠及经过优化验证的免疫沉淀必要试剂,使免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP,也称Pull-down)或免疫共沉淀(Co-IP)实验更加简单、便捷、高效,配合特异性抗体,广泛用于目的蛋白或其蛋白复合物的免疫沉淀、免疫共沉淀或纯化等实验。

▼产品规格

产品编号

CAT:RY8024

产品规格

配体

重组Protein A+G

磁珠表层材料

超顺磁亲水高分子磁珠

粒径大小

200nm

结合量

>0.6mg/ml磁珠

建议pH使用范围

6~8

沉降系数

2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s

磁珠保存液

1*PBS

保存

4℃,禁止冷冻,使用前请充分混匀

▼实验原理与应用场景

免疫沉淀或免疫共沉淀是研究蛋白或蛋白与蛋白相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)的常用实验技术,通过使用特异性抗体和可结合抗体的介质(如Protein A/G Agarose或Protein A/G磁珠),或直接使用偶联特异性抗体的介质(如琼脂糖凝胶或磁珠),然后通过离心或磁力从溶液中分离出抗原和抗体复合物,从而将目标蛋白质从复杂样品中分离出来,随后可以用于Western印迹检测或质谱分析等。

Protein A是一种发现于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的细胞壁表面蛋白,分子量为42kDa;Protein G是C型或G型链球菌(Streptococcal bacteria)表达的免疫球蛋白结合蛋白。Protein A和Protein G功能相似,能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)结合,结合的部位通常为免疫球蛋白的Fc区,但有资料显示Protein A也会和人VH3家族的Fab区结合,而Protein G有时与Fab区也有一定结合。同时,两者对于不同的免疫球蛋白亚类的结合能力有所不同。适当重组改造的Protein A、G与磁珠以一定的方式结合,可用于免疫沉淀或抗体的纯化。

本产品适用于动植物组织裂解液,细胞或菌体裂解液等复杂样品。

▼产品优势

本产品特异性强,结合量高:传统的Protein A+G琼脂糖凝胶孔径大,容易产生非特异吸附,而本产品磁珠粒径小,不易产生非特异吸附。本产品每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠,由Protein A磁珠和Protein G磁珠按1:1比例混合而成,含有不少于0.6mg重组Protein A、G,通常可结合不少于0.7mg人IgG,具体的最大结合量和抗体类型及目的蛋白等相关。每500微升样品,通常仅需使用10-20微升磁珠悬浊液,就可以高效地进行免疫沉淀实验。

本产品结合抗体或抗体复合物的速度快:本产品所使用的纳米级磁珠(~200nm)具有超大比表面积,便于磁珠与抗体或抗体复合物的快速有效结合。通常10分钟内即可完成抗体或其复合物的吸附的过程,30分钟内完成目的蛋白免疫沉淀操作。缩短操作时间可以有效避免在长时间操作过程中目的蛋白的降解或变性,充分保证目的蛋白的活性。由于采用磁性分离,每次进行IP和Co-IP相比于琼脂糖凝胶可以节省40%的时间。

本产品可选择多种洗脱方法:本产品根据抗体复合物中目的蛋白的结构、生物学功能及后续应用的要求等,可以使用多种洗脱方法,包括酸性溶液、SDS-PAGE上样缓冲液等洗脱液进行洗脱。

本产品使用便捷:本产品储存在特殊保护液中,不含甘油,可以通过磁性吸附实现快速高效的分离,无需离心操作。

▼实验流程

▼实验结果应用案例

▼技术支持

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